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氫氣治療癌癥是最近比較熱的研究方向，但是嚴(yán)格意義上氫氣對癌癥的治療作用并不明確，仍然需要大量基礎(chǔ)和臨床研究證據(jù)?；A(chǔ)研究方面應(yīng)該重點尋找氫氣治療癌癥的理論依據(jù)，臨床研究方面重點是確定氫氣治療各種類型癌癥的人體試驗證據(jù)。這兩個方面都非常重要，臨床試驗是為解決最終應(yīng)用的條件，沒有證據(jù)的應(yīng)用只能是探索性，存在許多不確定性，感謝氫氣對人體的安全性比較高，且對身體許多健康問題產(chǎn)生一定優(yōu)化作用，患者并不一定會付出太多代價。
基礎(chǔ)研究則需要從理論和邏輯上給出氫氣治療癌癥的依據(jù)。氫氣具有抗炎癥抗氧化作用，但抗癌癥的理論基礎(chǔ)并不堅實，甚至仍然難以理解，至少不應(yīng)該產(chǎn)生非常強(qiáng)的抗癌癥效應(yīng)。但是一些文章和初步的臨床結(jié)果提示氫氣對癌癥的作用非常強(qiáng)，這要求學(xué)術(shù)界應(yīng)該拿出符合邏輯，且確定性的理論解釋。
今天空軍軍醫(yī)大學(xué)師建國教授小組的報道屬于氫氣抗癌癥的理論探索，該研究從巨噬細(xì)胞角度提出了氫氣抗癌癥的解釋。不過抗癌癥作用的免疫細(xì)胞有許多，巨噬細(xì)胞只是其中一類，這應(yīng)該不是故事的全部。
以上為氫思語對氫氣抗癌癥研究的點評和看法，歡迎學(xué)術(shù)探討。
摘要：目的:探究氫氣聯(lián)合巨噬細(xì)胞對乳腺癌細(xì)胞生長的影響及其機(jī)制。方法:CCK8法和流式細(xì)胞術(shù)檢測癌細(xì)胞的活力及凋亡情況,ELISA檢測巨噬細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子TNF-α,IFN-γ,IL-10,Western blot檢測FADD、TRAF2、caspase3的表達(dá),流式細(xì)胞術(shù)和RT-PCR分析各組巨噬細(xì)胞標(biāo)志物CCR7、CD206的表達(dá)情況。結(jié)果:氫氣聯(lián)合巨噬細(xì)胞使乳腺癌細(xì)胞活力降低,凋亡增加;機(jī)制方面,氫氣聯(lián)合巨噬細(xì)胞增加了細(xì)胞因子TNF-α,IFN-γ的分泌,上調(diào)了凋亡通路中FADD、caspase3的表達(dá),并且促進(jìn)巨噬細(xì)胞向M1極化,抑制其向M2極化。結(jié)論:氫氣聯(lián)合巨噬細(xì)胞能抑制乳腺癌細(xì)胞生長。
乳腺癌是全球女性癌癥發(fā)病率最高的疾病，也是國內(nèi)外女性癌癥相關(guān)死亡的首要原因，且近年來發(fā)病逐漸呈現(xiàn)低齡化趨勢。氫氣( H2 ) 是一種可以從水中電離獲得的氣體，一直未曾在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域得到應(yīng)用。直到 2007 年，日本學(xué)者 Ohsawa 等報道，吸入 2% 的氫氣可明顯改善動物腦缺血再灌注損傷。隨后，氫氣在癌癥治療中的作用也得到了人們的關(guān)注。巨噬細(xì)胞( m) 是固有免疫的重要組成部分，分布廣泛，可塑性極強(qiáng)，在不同的刺激因素下可分化為激活免疫、抵御感染、抑制腫瘤發(fā)生的經(jīng)典活化( M1) 型巨噬細(xì)胞，和免疫抑制、化療耐藥、促進(jìn)腫瘤發(fā)展的交替活化( M2) 型巨噬細(xì)胞。本實驗探究氫氣聯(lián)合巨噬細(xì)胞對乳腺癌細(xì)胞生長產(chǎn)生的作用及可能機(jī)制，為今后的臨床研究提供新思路。
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
1.2.1 巨噬細(xì)胞的分離及乳腺癌MCF-7細(xì)胞培養(yǎng)
1.2.2 CCK8法分析乳腺癌MCF-7細(xì)胞活性
1.2.3 流式細(xì)胞術(shù)分析乳腺癌MCF-7細(xì)胞凋亡情況
1.2.4 ELISA檢測巨噬細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-10
1.2.5 Western blot檢測FADD、TRAF2、caspase3的表達(dá)
1.2.6 流式細(xì)胞術(shù)分析各組巨噬細(xì)胞標(biāo)志物CCR7、CD206的表達(dá)情況
1.2.7 RT-PCR分析各組巨噬細(xì)胞標(biāo)志物CCR7、CD206的基因表達(dá)情況
3 討論
乳腺癌是女性中最常見的惡性腫瘤，也是導(dǎo)致女性癌癥死亡的首要原因，盡管國內(nèi)外學(xué)者已在乳腺癌的早期診斷與治療中做了很多的努力，但仍有些生物分子分型較差的乳腺癌表現(xiàn)出極具侵襲性的生物學(xué)行為，導(dǎo)致較差的預(yù)后，因此還需進(jìn)一步地探尋其防治方法。
氫元素是自然界基本化學(xué)元素之一，也是有機(jī)生命組成最多的元素，氫可以作為電子傳遞介質(zhì)，參與生命能量轉(zhuǎn)化。雖然氫元素是生命元素，但以往在生物研究中卻較少涉及氫氣，這是因為常溫常壓條件下，氫氣的溶解度較低，不能被機(jī)體大量吸收利用。
曾有學(xué)者報道，高壓氫氣連續(xù)吸入 2 周后，荷瘤動物的皮膚惡性腫瘤明顯縮小，說明高壓氫氣可以有效治療皮膚惡性腫瘤，其機(jī)制可能為氫氣的抗氧化作用。2007 年，Ohsawa 等報道氫氣可顯著改善動物腦缺血再灌注損傷后，對氫氣的研究逐漸受到重視，涉及多個領(lǐng)域和疾病，如神經(jīng)系統(tǒng)損傷、電離輻射損傷、化療藥物引起的損傷、動脈粥樣硬化、失血性休克、呼吸系統(tǒng)惡性腫瘤、輔助放化療等。
在本研究中，首先檢測了氫氣聯(lián)合巨噬細(xì)胞對乳腺癌細(xì)胞 MCF- 7 生長的影響，可以看出通入氫氣后癌細(xì)胞的活性降低，流式細(xì)胞術(shù)檢測出凋亡率增高; 隨后對其可能的機(jī)制進(jìn)行了一系列的探究:
一方面，氫氣通入后，巨噬細(xì)胞所分泌的具有抑制、殺傷腫瘤細(xì)胞作用的細(xì)胞因子 TNF-α、IFN-γ增加，具有免疫抑制作用的細(xì)胞因子 IL-10 減少，說明氫氣能激活巨噬細(xì)胞抗瘤效應(yīng)，促進(jìn)巨噬細(xì)胞的免疫應(yīng)答;
另一方面，根據(jù)流式細(xì)胞術(shù)測出的結(jié)果，我們推測氫氣的抗腫瘤作用可能與誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡有關(guān)，為了驗證這一推論，我們對細(xì)胞內(nèi)凋亡通路中的幾個關(guān)鍵蛋白的表達(dá)水平進(jìn)行了檢測，F(xiàn)ADD 是死亡受體介導(dǎo)的凋亡途徑的關(guān)鍵啟動因子， caspase3 能逐步啟動層層級聯(lián)反應(yīng)，最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡，通入氫氣后，這兩者蛋白表達(dá)量在 Western blot 實驗中顯示有所上升，因此，氫氣在體外能夠顯著抑制 MCF- 7 細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，其作用可能與上調(diào) FADD，caspase3 蛋白的表達(dá)有關(guān);
最后，我們還通過流式細(xì)胞術(shù)和 ＲT - PCＲ 檢測了共培養(yǎng)體系中巨噬細(xì)胞的極化情況，巨噬細(xì)胞在外界刺激下可極化為 M1 和 M2 型，M1 型可抑制腫瘤發(fā)生，其標(biāo)志 物 為 CCＲ7; M2 型可促進(jìn)腫瘤生長，其 標(biāo) 志 物 為CD206; 流式實驗結(jié)果顯示通入氫氣培養(yǎng)后，CCＲ7 分子表達(dá)增加，CD206 分子表達(dá)下降，ＲT-PCＲ 實驗結(jié)果顯示二者基因表達(dá)也有相同改變趨勢，因此，氫氣聯(lián)合巨噬細(xì)胞能抑制乳腺癌 MCF-7 細(xì)胞生長與氫氣能促進(jìn)巨噬細(xì)胞 M1極化，抑制巨噬細(xì)胞 M2 極化有關(guān)。
參考
李佳蔚，師建國. 氫氣聯(lián)合巨噬細(xì)胞對乳腺癌細(xì)胞生長的影響[J]. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2020(23) :4036-4041
